Era hija de Elvira Soriano Picazo y del conocido actor Pepe Isbert. Estudió en el Colegio San Luis de los Franceses en Tres Cruces.
No sólo era hija de actor, sino que entre los siete hijos que tuvo con el actor húngaro Antonio Spitzer, con el que se casó el año 1949, dos de ellos, Toni Isbert y Carlos Ysbert, se han dedicado también a la interpretación.
Parece, según ha declarado incluso ella alguna vez, su padre no estaba muy de acuerdo en que se dedicara a la interpretación sin que tuviese la preparación necesaria.
Don Ole Primero, 1940; El refugio, 1940; Si papá levantara la cabeza, 1940; El refugio, 1941; El solterón, 1941; El trueno gordo, 1941; Mis simpáticos enemigos, 1941; Siempre llego tarde, 1942; La razón en la pecera, 1965; Cómo está el servicio, 1968; Sólo el amor y la luna traen fortuna, 1968; Un día en Madrid, 1969; El misterio de la nube roja, 1970; Florencia Falcón, abogado, 1971;
Propios y extraños, 2010; Envejece conmigo, 2005; R2 y el caso del cadáver sin cabeza, 2005; Semen: Una historia de amor, 2005; La gran aventura de Mortadelo y Filemón, 2003; Cásate conmigo, Maribel, 2002; Primer y último amor, 2002; El florido pensil, 2002; Y decirte alguna estupidez, por ejemplo, te quiero, 2000; Jara, 2000; La mujer más fea del mundo, 1999; Pecata minuta, 1998; Atilano, presidente, 1998; La duquesa roja, 1997; Los Porretas, 1996; Yo me bajo en la próxima, ¿y usted?, 1992; Pareja enloquecida busca madre de alquiler, 1990; El pañuelo de mármol, 1989; Amanece, que no es poco, 1989; El bosque animado, 1987; El pecador impecable, 1987; Policía, 1987; Cara de acelga, 1987; Capullito de alhelí, 1986; Los presuntos, 1986; Los nuevos curanderos, 1986; Tiempo de silencio, 1986; A la pálida luz de la luna, 1985; Réquiem por un campesino español, 1985; El donante, 1985; Los caraduros, 1983; Una pequeña movida, 1983; Cristóbal Colón, de oficio... descubridor, 1982;
Con dos tacones: ¡Mujer tenías que ser!, 2006
¿Se puede?: Lola/La locura de radio/Bety Perilenque/Entre las tres y las cuatro, 2004.
Manolito Gafotas: Una noche espeluznante, 2004
El comisario: Última sesión, 2004
7 vidas: El padre de la novia, 2003
Hospital Central: En el calor de urgencias, 2002
La verdad de Laura: 2002 (40 episodios)
Papá: Proverbio chino, 2001; Familia no hay más que una, 2001
Robles, investigador: Cargando con el muerto, 2001
Manos a la obra: Y si Adelita se fuera con otro, 2000
Raquel busca su sitio: Todo el mundo necesita un poco de amor, 2000
Maravillas 10 y pico: 1996 (Seis episodios)
¡Ay, Señor, Señor!: ¡Vejez, divino tesoro!, 1995; Bebé a bordo, 1994
¡Qué noche tan movida!: 1995
Por fin solos: Feliz aniversario, 1995
Villarriba y Villabajo: 1995 (25 episodios)
Hermanos de leche: Aires de tormenta, 1995
Habitación 503: Morir de amor, 1994
Los ladrones van a la oficina: De la oficina al cielo, 1993
Celia: ¡Hasta la vista!, 1993; Ni santa ni mártir, 1993; En el colegio, 1993; ¡El verano!, 1993; Doña Benita, 1993; Soy Celia, 1993
Eurocops: Shanghai Lilly, 1991
Pero ¿esto qué es?: 1989 (16 episodios)
Brigada central: Turno de noche, 1990
Primera función: El caso de la señora estupenda, 1989
Escalera interior, escalera exterior: Tolerancia, 1986; Babilonia, Babilonia, 1986; La gota fría, 1986; Ladrones de tumbas, 1986
Segunda enseñanza: Los pueblos del caballo, 1986
La comedia musical española: El sobre verde, 1985; Ana María, 1985;
Como Pedro por su casa: 1985 (Cuatro episodios)
Cinco minutos nada menos: 1984
1983Anillos de oro: El país de las maravillas, 1983
Estudio 1: El amante complaciente, 1982; Señora Ama, 1980; Mi señor es un señor, 1980; El señor Badanas, 1980; Cuidado con las personas formales, 1978; El retamal, 1972; Milagro en la casa de los López, 1972; El avaro, 1972; Daisy Miller, 1972
Teatro estudio: Milagro en Londres, 1981
Teatro breve: A morir que son dos días, 1981; La criatura, 1980; Fragmento de la vida de Mr. Thompson, 1971
A la caza de Eichman1979
Que usted lo mate bien: Una familia con clase, 1979
Los libros: Eugenia Grandet, 1977; Una crónica de Madrid, 1976; Cuentos de la Alhambra, 1974
Música y estrellas: 1976
Palabras cruzadas: El sueño, 1975
Cuentopos: 1974
Suspiros de España: Primer suspiro (1974)
Novela: Amor de sombras, 1974; Eugenia de Montijo, 1970
Noche de teatro: La visita de la vieja dama, 1974
Si yo fuera rico: Si yo fuera guapo, 1974
Animales racionales: Pequeños granujas, 1973
Tres eran tres: 1972 (Dos episodios)
Historias de Juan Español: Juan Español hace oposiciones, 1972
Plinio: El carnaval 1ª parte, 1972; El hombre lobo, 1972; Los carros vacíos, 1972
Cuentos y leyendas: Miau, 1972
Crónicas de un pueblo: Las comadrejas, 1972; El camión, 1971
Las doce caras de Eva: Libra, 1971; Virgo, 1971; Tauro, 1971
Del dicho al hecho: En boca cerrada no entran moscas, 1971
Bajo el mismo techo: Un billete de mil, 1970; El guateque de los niños, 1970; Las vacaciones de Lupe, 1970; En mi casa son así, 1970
Teatro de misterio: Mejor muerto, 1970
Remite: Maribel: Los catorce, 1970
Escuela de matrimonios: Inocentadas, 1967
El año 1945 recibió la Medalla del Círculo de Escritores Cinematográficos a la Mejor actriz secundaria por la película Un hombre de negocios.
El año 2001 recibió el premio homenaje de la Medalla del Círculo de Escritores Cinematográficos por su trayectoria artística.
El año 2002 fue la ganadora del Fotograma de plata a Toda una vida.
El año 1987 recibió la Medalla de Plata de las Bellas Artes.
El año 1988 tuvo una mención especial a la mejor interpretación en el tercer certamen de cortos de Dos Hermanas.
El año 1997 recibió el Premio a la mejor labor de reparto del Festival de Cine de Peñíscola.
El año 1998 recibió el Premio de Teatro Rojas de Toledo a la mejor actriz por la obra Un espíritu burlón.
El año 1999 recibió el Premio Nacional de Teatro 'Pepe Isbert de la Asociación Amigos de los Teatros de España AMITE.
El año 2003 recibió el Premio de la Unión de Actores a su carrera.
El año 2008 fue nombrada Académica de honor de la Academia de las Artes y las Ciencias Cinematográficas de España.
El año 2009 recibió el Título de Ciudadana Ilustre de Tarazona de la Mancha.
El año 2011 recibió la Medalla de Oro de Castilla-La Mancha, a título póstumo.
María Isbert falleció en Villarrobledo, Albacete, el 25 de abril de 2011 a los 94 años.
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